狗狗怎么做遗传病检查?
目前,犬的遗传性疾病的检测方法主要有三种:染色体显微观察、分子遗传学分析以及基因诊断技术(PCR)。下面逐一进行介绍和比较 一 染色体显微观察 通过显微镜直接对遗传病的患犬的细胞进行核型分析研究,确定疾病是否由遗传基因异常导致。这种技术的优点是快速而且直观,不需要特殊的仪器设备;缺点是只能观察染色体的整体形态而不能分析具体的基因。由于这种方法操作复杂耗时费力,所以通常用于临床常见的遗传病的研究,而一些隐性遗传的疾病则很难得到有说服力的结果。 2001年Woolliams等人在使用这个方法研究了106头拉布拉多犬后发现了9个隐性遗传基因突变,其中四个与骨骼发育不全有关[5](SEMI, SMAH/C, CHL3, CHB4),两个影响嗅觉功能(OCCL和NFCD),一个涉及心脏传导障碍(PMP-LVK),另一个则是肾脏病变(CNTI)。这九种缺陷在患犬身上的表现形式都是相同的,只是严重程度不同而已。但是这项研究发现的一个疑点在于,所调查的这些患病犬的父母中都没有表现出任何疾病症状,因此这些狗的发病原因应该是最近的几代繁殖导致的变异。事实上,这种情况在我国宠物市场上屡见不鲜——很多出售小狗的主人根本不清楚自家小狗的父母是哪两只犬,更有甚者连繁殖者也说不清楚。在这种情况下,仅靠染色体显微镜的检查是无法判断小狗是否有遗传病的。
二 PCR 该方法是1983年由美国科学家Mullis创立的一种新型DNA扩增技术[6],其基本原理是利用DNA聚合酶的特性将微量甚至近乎纯化的DNA不断复制出上百万倍,这一过程被称为扩增。由于PCR能够大量扩增DNA片段,因此被广泛的运用于病毒的鉴定、诊断和治疗等方面。近年来,PCR也被越来越多地应用于遗传病的检测。PCR的基本步骤包括引物设计、目的DNA片段的提取、变性、退火和对映复制。
目前人们已经建立了许多针对不同品种动物的不同遗传病DNA片段的探针,只要取少量的血液或是口腔黏膜细胞就可以从中提取到相关的目的DNA片段,然后对其进行PCR反应即可检测出相应的致病基因突变点。 PCR方法的优点是能够检测到非常微弱的突变,因而可以尽早发现携带潜在致病因子的犬只并予以绝育,还可以用来寻找新的致病基因或确定潜在的易感基因区段从而为育种工作提供指导;缺点是需要较高的费用,操作相对复杂且检验结果需要进一步的证实才能作为临床诊断的依据。
三 分子标记 分子标记又称序列特异的扩增片段长度多态性(Sequenctially specific amplified fragment length polymorphism, S-AFLPs),它是基于基因组的随机片段扩增的多态性,是在RFLP基础上发展起来的一项新技术 [7].它的应用范围也很广,从个体识别、基因分型及遗传距离计算直到作图定位,都可以用分子标记来实现[8] 目前已知的分子标记大致分为四类,分别是单链构象多态性SSCP (Single Strand Conformation Polymorphism)、序列特异性扩增多态性(Sequence Specific AmplificationPolymorphism , APS )、简单重复序列(Simple Sequence Repeat, SSR); 和扩增长度多变序列(Amplified Fragment Length Polymorphism, AFLP)[9] 这四种。每一种都有各自的优缺点和应用场合。